顯微鏡是一種精密的光學儀器，是研究植物細胞結構、組織特征和器官構造的重要的和不可取代的工具。我們必須很好地掌握顯微鏡的構造、使用方法及注意事項并學會zui起碼的維修保養(yǎng)顯微鏡的知識，以延長它的使用時間。

一、實驗目的與要求：

1．了解顯微鏡的構造及其維護方法。

2．初步掌握顯微鏡的使用方法，明確使用中的注意事項。

二、實驗材料：紅綢制片，“上”字制片。

三、實驗儀器：顯微鏡。

四、實驗內容與方法：

一 顯微鏡的構造和性能：

顯微鏡的種類很多，可分為光學顯微鏡和電子顯微鏡兩大類。

光學顯微鏡是以可見光作光源，用玻璃制作透鏡的顯微鏡?？煞譃閱问斤@微鏡與復式顯微鏡兩類。單式顯微鏡結構簡單，常用的有如擴大鏡，由一個透鏡組成，放大倍數(shù)在10倍以下。結構稍復雜的單式顯微鏡為解剖顯微鏡，也稱實體顯微鏡，是由幾個透鏡組成的，其放大倍數(shù)在200倍以下。擴大鏡和解剖顯微鏡放大的物像都是直立的虛象。

復式顯微鏡結構比較復雜，至少由兩組以上的透鏡組成，放大倍數(shù)可達1250倍，zui高分辯力為0.2微米（1微米=1/1000毫米）。是植物形態(tài)解剖實驗zui常用的顯微鏡。

電子顯微鏡是以電子束作光源的顯微鏡。其以特殊的電極和磁極作為透鏡代替玻璃透鏡，能分辯相距2埃（A）左右的物體（1埃=1/10000微米），放大倍數(shù)可達80-120萬倍，分辯力比光學顯微鏡大1000倍，是了解超微世界的重要的精密儀器。

雖然顯微鏡種類很多，每一種又有若干型號，但其基本構造是一樣的。（如圖1-1為單筒復式顯微鏡，圖1-2為雙筒復式顯微鏡）。

顯微鏡的構造可分為保證成象的光學系統(tǒng)和用以安裝光學系統(tǒng)的機械部分（圖1：1-2）。

1．機械部分：

⑴鏡座和鏡柱：鏡座為顯微鏡的底座，支持整個鏡體，使之放置穩(wěn)定。鏡柱是鏡座之的短柱形物，支持鏡體上部的各部分。

⑵ 鏡臂：是鏡柱上面的弓形部分，為手提之處，連接并支撐鏡筒、載物臺等機械部分。在單筒復式顯微鏡鏡臂的下端與鏡柱連接處有一活動關節(jié)，稱傾斜關節(jié)，可使顯微鏡在一定的范圍內后傾，便于觀察。

⑶ 鏡筒：是一中空的金屬圓筒，其上端放置目鏡，下端與物鏡轉換器相連，并使目鏡和物鏡的配合保持一定的距離，一般是160毫米，有的是170毫米。鏡筒可借助鏡臂上調節(jié)輪的作用，靈活地上下移動，用以調焦。其作用是保護成象的光路與亮度。

⑷ 物鏡轉換器：為一金屬圓盤，位于鏡筒下方，由兩個凹面向上的金屬圓盤構成。上盤固定在鏡筒下方，下盤與上盤相連，下盤上有3-4個螺旋圓孔，以安裝不同倍數(shù)的物鏡，下盤中央有一螺旋與上盤相連，可以轉動，以更換物鏡。當物鏡固定在使用的位置上時，可保證物鏡與目鏡的光線合軸。

⑸ 載物臺：為圓形或方形平臺，是放置玻片標本的地方，臺中央有一個圓形通光孔，光線由通光孔下方的反光鏡反射上來。臺上安裝有平臺移動器，既可固定標本，又可通過其螺旋，前后左右移動標本。

⑹ 調節(jié)輪：裝置在鏡臂兩側，分大小兩種，大的為粗調節(jié)輪，向內或向外轉動一周，可使鏡筒上升或下降0.1厘米，使用低倍物鏡觀察材料時必須用其校準焦距；小的為細調節(jié)輪，旋轉一周鏡筒升降0.1毫米，使用高倍物鏡觀察材料時用其調焦。

2．光學部分：

光學部分包括物鏡、目鏡、聚光器、反光鏡等。物鏡和目鏡直接參與顯微鏡的成像，聚光器和反光鏡起調節(jié)光強度和改變入射光的作用（圖1-3）。

⑴ 物鏡：

物鏡也叫接物鏡（或鏡頭），它由1~5組透鏡組成，其功能是聚集來自標本的光線，使標本*次放大成一個倒立的實像。

A．放大倍數(shù)：

一般物鏡的放大倍數(shù)都在鏡頭上注明：從3×到100×，常用的低倍鏡為10×，高倍鏡為40×，油鏡頭為100×，放大倍數(shù)的計算方法：

物鏡的放大倍數(shù)=相當?shù)墓鈱W筒長/物鏡的焦距

（光學筒長=物鏡上焦點平面到目鏡下焦點平面的距離）

b．工作距離：

是指物鏡zui下面透鏡的表面到蓋玻片上表面之間的距離。物鏡的放大倍數(shù)越大，它的工作距離越小。低倍鏡的工作距離為6.5毫米，高倍鏡為0.6毫米，而油鏡頭僅為0.2毫米，使用時要倍加注意。

C．焦點深度：

是指視野中垂直范圍內所能清晰觀察到的界限。在用不同倍數(shù)的物鏡觀察物體時，所能看到垂直的清晰范圍是不同的。物鏡的倍數(shù)越大，焦點深度越淺。

D．分辨力：

是分辯被檢物體細微結構的能力，也就是判別兩個物體點之間zui短距離的本領。是衡量顯微鏡質量優(yōu)劣的主要根據(jù)。分辨力與鏡口率（又稱數(shù)值孔徑）關系很大，鏡口率越大，分辯率越高，物鏡的價值也就越高。

（鏡口率：是被檢物體與物鏡之間介質的折射率與鏡口角正弦的乘積，N.A=hsinx）

分辯力：低倍鏡為1μm，高倍鏡為0.42μm，油鏡為0.22μm。

⑵ 目鏡：

也叫接目鏡，其作用是將由物鏡放大的倒立實像放大成一個正立的虛像。目鏡僅起放大物像的作用，并不增加顯微鏡的分辨力。一般目鏡有數(shù)個，它的放大倍數(shù)分別是5×，7×，10×，15×等。

⑶ 聚光器：

安裝在載物臺下，一般由2~3個凸透鏡組成，上面的透鏡是平面的。它的功用是收集從光源射來的平行光線，并匯集成光束，集中在一點，以增強照明度，再經過被檢物體照射到物 鏡中去。利用齒輪和齒條升降，能調節(jié)光線的強弱，使物像明晰。

⑷ 虹彩光圈：

裝在聚光器之下，由一片壓一片的鐵片組成。調拔操縱桿可以改變光圈的大小，調節(jié)光線的強弱。有的顯微鏡在載物臺下安裝有盤光闌，它是一片有數(shù)個口徑大小不同并可轉動的金屬圓盤。它旋轉時，可以調節(jié)下方反射來的光線強弱，以適于被檢標本的要求。

⑸ 反光鏡：

安裝在聚光器及虹彩光圈的下方。它可向各方向轉動，它的作用是把光源射出的光線反射至聚光器或通光孔。它分平、凹兩面，凹面鏡有聚光作用，在光源微弱時使用，如光源充足則用平面鏡。